sábado, 25 de junio de 2016

TERAPIA CON STEM CELLS EN LA DIABETES MELLITUS

Los estudios clínicos recientes sobre implante de islotes pancreáticos procedentes de donantes en pacientes diabéticos han alimentado las expectativas de un tratamiento generalizado basado en esta metodología; no obstante, existe una gran desproporción entre los posibles donantes y el número de pacientes con diabetes que podrían recibir este tratamiento. Esta falta de órganos y tejidos que podría permitir una terapia celular, no sólo para la diabetes sino para otras enfermedades que requieren igualmente un recambio celular, ha relanzado recientemente la investigación sobre las posibilidades terapéuticas de las denominadas células madre pluripotenciales.


BIBLIOGRAFIA:

JA REIG a, R ENSEÑAT-WASER a, E ROCHE a, B SORIA a. Terapia celular en la diabetes mellitus [Internet][citado 25 junio 2016]. Disponible en: http://www.elsevier.es/es-revista-endocrinologia-nutricion-12-articulo-terapia-celular-diabetes-mellitus-13037722
¿Cuáles son las causas de las mutaciones en los genes causantes de la Esquizofrenia y por qué se producen?

Sabemos que el riesgo para padecer esquizofrenia se incrementa en función del número de genes compartidos con la persona afectada. se presenta con más frecuencia entre los familiares de esquizofrénicos que en la población general. Sólo un 20% de los esquizofrénicos presenta antecedentes familiares de esquizofrenia en familiares de primer grado, y el 37% de los pacientes posee historia familiar de esquizofrenia
En concreto, en la región q11-13 del cromosoma 22 se han hallado posibles genes candidatos relacionados con las proteínas que regulan la función presináptica48, y el riesgo relativo de esquizofrenia en adultos con síndrome velo-cardio-facial, relacionado con alteraciones cromosómicas en la región q11.2 del cromosoma 22, es superior al de la población general49. Destacan también las anomalías en los cromosomas sexuales, que llegan a describirse con una frecuencia hasta seis veces superior a la de la población general
Por el momento, entre otros muchos genes estudiados, parece haberse descartado la asociación con polimorfismos situados en el gen para la dopamina ß -hidroxilasa10, y en los genes para los receptores serotoninérgicos 5HT2A, 5HT2C y los dopaminérgicos D3 y D4. Algunos estudios sugieren una relación entre la respuesta clínica al tratamiento con clozapina y la varabilidad genética del 5HT2A11. En los pacientes de raza blanca con esquizofrenia se han encontrado cocientes más elevados del gen HLA-DR4, y en los japoneses, razones más elevadas del gen HLA-DRB1

BIBLIOGRAFÍA:
R Coronas a, FJ Arrufat a, C Domènech a, JV Cobo a. Factores de riesgo de aparición de esquizofrenia  [Internet][citado 25 junio 2016]. Disponible en: http://www.elsevier.es/es-revista-psiquiatria-biologica-46-articulo-factores-riesgo-aparicion-esquizofrenia-13033909



EJEMPLO DE TRANSGÉNICO EN DIABETES MELLITUS

La diabetes mellitus (DM) es una enfermedad metabólica crónica que está adquiriendo en los últimos años proporciones de auténtica epidemia. Una de las principales complicaciones es la retinopatía diabética (RD) que genera un deterioro en los vasos sanguíneos de la retina.


VENTAJAS:

1. Se ha logrado establecer modelos de Retinitis Diabética en perros, gatos, cerdos y monos, en estos mamíferos los cambios observados en los vasos sanguíneos retinales asociados con los diferentes estadios de la retinopatía son similares a los observados en humanos diabéticos.
2. Respecto a modelos espontáneos de diabetes tipo 2 en ratas obesas, la cepa Zucker, presenta cambios cuantificables en la vasculatura, por lo cual constituye un excelente modelo para el desarrollo de nuevos agentes farmacológicos
3. Modelos de ratas no obesas con diabetes tipo 2, las Goto-Kakizaki son de gran ayuda para el estudio de cambios en la microcirculación retinal durante largos períodos de tiempo, debido al mantenimiento de su estado diabético
4. Los ratones Akita es útil para analizar drogas neuroprotectivas en un periodo de tiempo relativamente corto (4-5 meses) además de permitir estudiar la iniciación y progresión precoz de la RD.
5. El Psammomys obesus, resistente a insulina e hiperglucémico, además de alteraciones vasculares y no vasculares características de la RD, una reducida expresión de opsinas en los conos, lo cual también se observa en la retinopatía, en humanos. Esta última característica sugiere el uso de este modelo para analizar terapias neuronales específicas, las cuales son difíciles de estudiar experimentalmente en humanos

DESVENTAJAS:

1. Presentan múltiples desventajas como el elevado costo de mantenimiento, la falta de anticuerpos específicos, el desarrollo lento de la patología,  y técnicas de manipulación genética menos precisas
2. Las ratas son generalmente más grandes y más fáciles de manejar que los ratones. Sin embargo, no son tan fáciles de manipular genéticamente como los ratones que tienen un historial y líneas genéticamente definidas, además de cientos de mutaciones y rearreglos cromosómicos disponibles.
3. Las ratas Torii, desarrollan neovascularización en ausencia de isquemia, lo cual no ocurre en individuos diabéticos. Por lo tanto, se necesitan estudios adicionales antes de que puedan ser consideradas como un modelo de RD. 
4. Serán necesarias nuevas investigaciones que apunten al desarrollo de modelos animales que reproduzcan la progresión de la RD en un corto periodo de tiempo (no mayor a 2 años), y sean además capaces de reproducir las alteraciones funcionales (no vasculares) de la etapa pre-clínica
5. Si bien los roedores alimentados con dietas ricas en galactosa carecen de anormalidades metabólicas características de la diabetes, desarrollan complicaciones retinianas por lo cual pueden ser considerados como una valiosa herramienta para el estudio de la patogénesis de la RD.

BIBLIOGRAFIA:

Paula V. Subirada Caldarone, Biól. Valeria E. Lorenc y Dra. María Cecilia Sánchez . Modelos animales de retinopatía diabética: comprensión de la patogénesis y potencial utilización en el desarrollo de nuevos agentes terapéuticos [Internet][citado 25 junio 2016]. Disponible en: http://www.revistas.unc.edu.ar/index.php/Bitacora/article/view/5575/6032




jueves, 16 de junio de 2016

EJEMPLO DE ADN RECOMBINANTE EN LA NATURALEZA

ADN RECOMBINANTE-EcoRI


El DNA recombinante se refiere  a la creación de nuevas combinaciones de segmentos o de moléculas de DNA que no se encuentran juntas de manera natural. Aunque el proceso genético de la recombinación produce DNA recombinante, este término se reserva a las moléculas de DNA producidas por la unión de segmentos que provienen de diferentes fuentes biológicas. La tecnología del DNA recombinante utiliza técnicas que provienen de la bioquímica de los ácidos nucleicos unidas a metodologías genéricas desarrolladas originalmente para la investigación de bacterias y de virus. 

La enzima de restricción EcoRI reconoce y se une a la secuencia palindrómica GAATTC. El corte del DNA en este sitio produce colas de cadena sencilla complementarias. La colas de cadena sencilla resultantes pueden unirse con colas complementarias de otros fragmentos de DNA para formar moléculas de DNA recombinante.

Para formar moléculas de DNA recombinante, se corta DNA de distintas fuentes con EcoRI y se mezcla para que se unan formando moléculas recombinantes. Después se utiliza la enzima DNA ligasa para unirlos covalentemente en moléculas de DNA recombinante.

Referencias:
Cultek S.L.U. Tecnología del DNA Recombinante [Internet][citado 16 junio 2016]. Disponible en:  http://www.cultek.com/inf/otros/soluciones/DNA-recombinante/Tecnica%20DNA%20recombinante.pdf

EJEMPLO DE ADN RECOMBINANTE EN LA DIABETES MELLITUS 


ANÁLOGOS DE LA INSULINA-DIABETES MELLITUS


La tecnología recombinante del ADN ha permitido disponer de los análogos de insulina, tanto rápidos como basales, que han aportado algunos beneficios sobre la insulina regular y NPH para el tratamiento de la diabetes mellitus. Se incluyen tanto los análogos de insulina de acción rápida (lispro, aspártica y glulisina) como los de acción prolongada (glargina y determir). Estos beneficios van desde posologías de inyección preprandial, e incluso posprandial, más cómodas y versátiles en los análogos de insulina rápida. También existe una clara disminución del riesgo de hipoglucemias nocturnas con los análogos de insulina basal, incluso la ganancia de peso al insulinizar con detemir es menor que con otras insulinas. No obstante, existen áreas donde debemos profundizar nuestro conocimiento sobre el uso de estas moléculas como son las mujeres con diabetes mellitus en periodo de gestación y la diabetes gestacional. Así mismo, la diferente afinidad por el receptor de IGF-1 de este grupo de moléculas, debe hacernos pensar en esta familia de moléculas no como un grupo homogéneo, debiendo estar atentos a futuros hallazgos en relación con la seguridad de alguno de los análogos.




Referencias:

D.A. de Luis y E. Romero. Análogos de insulina: modificaciones en la estructura, consecuencias moleculares y metabólicas. [Internet][citado 16 Mayo 2016].Disponible en:  http://apps.elsevier.es/watermark/ctl_servlet?_f=10&pident_articulo=90187139&pident_usuario=0&pcontactid=&pident_revista=40&ty=29&accion=L&origen=zonadelectura&web=www.elsevier.es&lan=es&fichero=40v39n01a90187139pdf001.pdf

sábado, 11 de junio de 2016

Prueba Molecular para la Diabetes Mellitus


El método tipo Southern o Southern blot fue desarrollado para la detección de genes específicos en el ADN celular. 
  1.       El análisis de polimorfismos puede realizarse mediante la utilización de varias técnicas, tales como la técnica de hibridación de Southern, o mediante amplificación de ADN por la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y posterior digestión de los productos de la amplificación con endonucleasas de restricción, ya que los cambios en la secuencia de ADN suelen ser detectables por la generación o la supresión de secuencias diana características de las diferentes enzimas de restricción, lo que conduce a la aparición de fragmentos de ADN de diferentes tamaños (denominados RFLPs, por «restriction fragment length polymorphism») que se pueden separar mediante electroforesis en geles de agarosa o poliacrilamida.
  2.      La sonda unida al fragmento de ADN complementario se puede visualizar en el filtro de una forma sencilla mediante una exposición a una película de rayos X para el caso de sondas radiactivas o con una película sensible a la luz, para el caso de sondas con fluorocromo. 
  3.    Los recientes desarrollos en la tecnología en la aplicación de las nuevas técnicas de microdetectores (los llamados microarrays o «arrays» de ADN) permite el análisis simultáneo de un gran número de polimorfismos. 
  4.      Con el uso de alguna de estas técnicas podemos proceder al genotipado de individuos, de familias o de grupos de población para determinar la representación de alelos polimórficos presentes en cada individuo (haplotipos), o para estudiar su segregación a través de las sucesivas generaciones de una familia. 
  5.         Una vez conocida la frecuencia de aparición de un alelo en una determinada población con ECV se compara con su frecuencia en la población sana. Si el alelo en cuestión es significativamente más frecuente en el grupo con ECV estamos ante un marcador genético, que consideramos como un factor de riesgo de dicha enfermedad. [2]

 
https://www.youtube.com/watch?v=1Q-_qgCtk3c


Bibliografía:
[1] S. Martínez-Hervás, A.B. García-Garcíaa , F.J. Chaves. Técnicas para el estudio del ADN y el ARN. Introducción al estudio de proteínas. .[Internet].2007 [citado 11 de junio de 2016]; Disponible en: http://www.avancesendiabetologia.org/gestor/upload/revistaAvances/23-6-4.pdf
[2] A. Ocaña-Fuentes, A. Coloma, y Grupo de la Sociedad Española de Diabetes para el Estudio de la Nutrición (GSEDNu). Factores genéticos de riesgo microvascular y macrovascular en la diabetes mellitus.[Internet].2003 [citado 11 de junio de 2016]; Disponible en: http://www.sediabetes.org/gestor/upload/revista/00001975archivorevista.pdf#page=5

[3] Southern Blot.[Internet].2011 [citado 11 de junio de 2016]; Disponible en:  https://www.youtube.com/watch?v=1Q-_qgCtk3c