Prueba Molecular para la Diabetes Mellitus

El método tipo Southern o Southern blot fue desarrollado para la detección de genes específicos en el ADN celular. 

1.       El análisis de polimorfismos puede realizarse mediante la utilización de varias técnicas, tales como la técnica de hibridación de Southern, o mediante amplificación de ADN por la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y posterior digestión de los productos de la amplificación con endonucleasas de restricción, ya que los cambios en la secuencia de ADN suelen ser detectables por la generación o la supresión de secuencias diana características de las diferentes enzimas de restricción, lo que conduce a la aparición de fragmentos de ADN de diferentes tamaños (denominados RFLPs, por «restriction fragment length polymorphism») que se pueden separar mediante electroforesis en geles de agarosa o poliacrilamida.
2.      La sonda unida al fragmento de ADN complementario se puede visualizar en el filtro de una forma sencilla mediante una exposición a una película de rayos X para el caso de sondas radiactivas o con una película sensible a la luz, para el caso de sondas con fluorocromo. 
3.    Los recientes desarrollos en la tecnología en la aplicación de las nuevas técnicas de microdetectores (los llamados microarrays o «arrays» de ADN) permite el análisis simultáneo de un gran número de polimorfismos. 
4.      Con el uso de alguna de estas técnicas podemos proceder al genotipado de individuos, de familias o de grupos de población para determinar la representación de alelos polimórficos presentes en cada individuo (haplotipos), o para estudiar su segregación a través de las sucesivas generaciones de una familia. 
5.         Una vez conocida la frecuencia de aparición de un alelo en una determinada población con ECV se compara con su frecuencia en la población sana. Si el alelo en cuestión es significativamente más frecuente en el grupo con ECV estamos ante un marcador genético, que consideramos como un factor de riesgo de dicha enfermedad. [2]

 

https://www.youtube.com/watch?v=1Q-_qgCtk3c

Bibliografía:

[1] S. Martínez-Hervás, A.B. García-Garcíaa , F.J. Chaves. Técnicas para el estudio del ADN y el ARN. Introducción al estudio de proteínas. .[Internet].2007 [citado 11 de junio de 2016]; Disponible en: http://www.avancesendiabetologia.org/gestor/upload/revistaAvances/23-6-4.pdf

[2] A. Ocaña-Fuentes, A. Coloma, y Grupo de la Sociedad Española de Diabetes para el Estudio de la Nutrición (GSEDNu). Factores genéticos de riesgo microvascular y macrovascular en la diabetes mellitus.[Internet].2003 [citado 11 de junio de 2016]; Disponible en: http://www.sediabetes.org/gestor/upload/revista/00001975archivorevista.pdf#page=5

[3] Southern Blot.[Internet].2011 [citado 11 de junio de 2016]; Disponible en:  https://www.youtube.com/watch?v=1Q-_qgCtk3c